Produkt des Monats: Mai
Diesen Mai besonders günstig bei neoFroxx: IPTG für die Biochemie.
Isopropyl-β-D-thiogalactopyranosid (IPTG) ist bei Klonierungsexperimenten mit E. coli nicht wegzudenken. Als künstlicher Aktivator des Lactose-Operons sorgt IPTG dafür, dass die Expression von Genen gezielt angeschaltet werden kann. Es lassen sich also auf „Knopfdruck“ rekombinante Proteine herstellen. Das Gen von Interesse muss dazu lediglich so in ein geeignetes Plasmid kloniert werden, dass es sich unter der Kontrolle eines Lac-Repressor-regulierten Promotors befindet.
Der Vorteil von IPTG liegt darin, dass es von den Bakterien nicht verstoffwechselt wird und seine Konzentration während der Expression konstant bleibt – im Gegensatz zum natürlichen Aktivator des Lac-Operons, Lactose bzw. Allolactose.
IPTG-Stammlösungen (z.B. 1 M IPTG in Wasser; durch 0,2 μm Filter steril filtriert) sind bei Tiefkühllagerung bis zu sechs Monate stabil. Die Arbeitskonzentration im Medium beträgt üblicherweise zwischen 0,2 mM und 1,0 mM.
Unser IPTG für die Biochemie ist pflanzlichen Ursprungs und wird durch Fermentation hergestellt.